在近期的核酸檢測中,基因擴增實驗室的建設越來越得到重視,因為它對檢測結果的可靠性、準確性和安全性起到了至關重要的作用。基因擴增實驗室即PCR實驗室,是一種分子生物學技術,其特點是能將微量的DNA大幅增加。PCR實驗室主要可分為四個區域。
PCR實驗室平面圖:
1、試劑準備室
該區域的功能是貯存實驗試劑的制備、實驗試劑的分裝、主反應混合液的制備。注意事項是實驗項目所采用的材料,如實驗試劑與實驗試劑原料,標本與標本原料等,這些都務必儲放于本區域內。對于是否需要調節氣流壓力,該區域沒有嚴格規范。它的主要儀器設備有:超凈臺、加樣器、混勻器、純水機、消毒車、天平和離心機等,加樣器、天平不僅要專用外,還應該有定期進行校正,試劑分裝應在超凈臺中開展,擴增反應混合液應采用分子生物學級別的,實際制備好后應該有質檢,一是看有沒有污染、二是看檢測試劑的擴增實際效果。
2、樣品制備室
該區域的功能是臨床標本的儲存、核酸(RNA與DNA)的提取與貯存、核酸加入至擴增反應管和測量RNA時DNA的合成。注意事項是為了避免 相鄰板塊的空氣進到本區,壓力梯度對比相鄰板塊要設置成正壓。開展實驗項目的操作時,工作人員要防止多余的走動,以避免 加樣操作中產生氣溶膠污染。它的主要儀器設備有:安全柜、加樣器、消毒車、冰箱、水浴鍋、生物安全柜、離心機、混勻器。
3、擴增室
該區域的功能是DNA擴增、把制備的實驗試劑制成反應混合液。注意事項是試驗擴增的污染指數相對較高,壓力梯度相比鄰近板塊要設置成負壓,這樣做的優勢是能合理避免氣溶膠從本區泄漏。它的主要儀器設備有:消毒車、PCR儀、離心機、可移動紫外燈、微量加樣器,PCR儀需要進行校準,并制備UPS電源,以避免因為電壓的波動,斷電對擴增效果的不良影響。
4、產物分析室
此區域的功能是檢測相關擴增片段。注意事項是實驗室設計時如果已經預置了全自動封閉分析儀器,那么就沒有必要再劃分本區了。本區的壓力梯度相比鄰近區域要設置成負壓,這樣做的優勢是能合理避免 擴增物質擴散至其它區域。該區域的主要儀器設備有:消毒車、電泳儀、超凈臺、電熱板、成像儀、雜交儀、凝膠。
以上就是一個完整的PCR實驗室的設備區域構成,在進行PCR操作時,操作人員一定要嚴格遵守一些操作規程,最大程度地降低可能出現的PCR污染事故的發生。
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